小鼠树突状细胞分泌的Exosome对同种异体T细胞增殖影响的实验研究

【摘要】目的：通过不同手段处理小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)，分别提取其分泌的Exosome，研究Exosome表型变化以及其对小鼠同种异体脾脏来源的T淋巴细胞增殖的影响，来寻找优化DC培养方案，探索DC源Exosome对T淋巴细胞的作用机制。方法：首先检测并验证应用病原微生物产物LPS、抑炎因子IL-10、糖皮质激素地塞米松等手段对DC表面分子表达的影响；然后在以上实验基础上提取A：5天无处理组，B：7天无处理组，C：7天LPS组，D：7天地塞米松组，E：7天IL-10组。提取不同培养条件下昆明小鼠骨髓源DC分泌的Exosome，用ICR小鼠（Tcell+imDC）+昆明小鼠Exosome模拟混合淋巴细胞反应（MLR），CCK-8方法检测计算各组Exosome对同种异体T淋巴细胞的增殖抑制率。结果：(1)DC表面分子MHC-II、CD80、CD86表达量变化比较如下：LPS组DC表面分子MHC-II、CD80、CD86表达量较其他组明显升高（P<0.05）。(2)各组提取的Exosome表面分子表达量比较如下：MHC-II表达量B组分别与另外四组比较有统计学差异（P<0.05），CD80表达量C组分别与A组、E组比较有显著统计学差异（P<0.05），CD86表达量C组分别与A组、E组比较有统计学差异（P<0.05）。各组提取的Exosome对T细胞增殖抑制率均为正值，各组之间比较均有统计学差异（P<0.05），另外各组组内不同浓度比较亦均有统计学差异（P<0.05）。结论：（1）DC表面分子MHC-II、CD80及CD86表达量随着时间推移逐渐上调，是随时间逐渐走向成熟的过程；地塞米松及IL-10具有拮抗LPS促imDC成熟作用，降低DC表面MHC-II、CD80及CD86的表达量。（2）Exosome表面分子表达量与其来源细胞有关，不同处理组DC来源的Exosome其表面分子表达量不同。（3）各实验组提取的Exosome在imDC辅助下均有抑制T淋巴细胞增殖的作用，且5天无处理组、7天无处理组、7天地塞米松组、7天IL-10组Exosome对T淋巴细胞的增殖抑制率较7天LPS组明显高，并呈现浓度依赖性。各实验组中7天IL-10组抑制T淋巴细胞增殖效果最好。
【作者】许经伟；
【导师】沈振亚；
【作者基本信息】苏州大学，胸心血管外科学，2014，硕士
【关键词】小鼠；树突状细胞；Exosome；T淋巴细胞增殖；

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